불검화물 측정법

 

1. 불검화물 일반 실험법 내용

1) 정의 : 검체 중의 수산화칼륨 (KOH)에 검화 되지 않고 유기용매에 녹으며 물에 녹지 않는 물질.
2) 원리

• RCOOR' + KOH →RCOOK +R'OH : 검화 과정을 거쳐 에텔, 트리글리세라이드 등의 검화 된 물질은 물층으로 추출하여 제거한다. 
• 검화 되지 않고 유기용매 (에텔)에 녹는 물질을 에텔로 추출한 후 건고한 후 0.1N KOH에탄올 액으로 적정하여 혼입 된 지방산을 적정하여 계산한다. 
• 특징 : 불검화물은 검화되지 않는 물질의 양을 대략 측정할 수 있다. 
• 불검화물에 혼입된 지방산을 KOH로 적정하여 계산하는 방법  

불검화물 (%) = [ {불검화물(g) + 혼입된 지방산(g)} / 시료량(g) ] x 100

2. 불검화물 측정 조작법

1. 따로 규정이 없는 한 검체 약 5g을 정밀하게 달아 250㎖의 플라스크에 넣고 수산화칼륨·에탄올 시액 50㎖를 넣고 환류냉각기를 달아 수욕상에서 때때로 흔들어 섞으면서 1시간을 천천히 끓인 다음 제1의 분액깔대기에 옮긴다.
2. 플라스크는 온수 100㎖로 씻고 씻은 액은 제 1의 분액깔대기에 넣고 여기에 물 50㎖를 넣어 실온이 될 때까지 식힌다.
3. 다음 에텔 100㎖로 플라스크를 씻고 씻은 액을 제 1의 분액 깔때기에 넣고 1분간 세게 흔들어 섞어 추출한 다음 명확하게 두층으로 나누어질 때까지 방치한다.
4. 물층은 제2의 분액깔대기에 옮기고 에텔 50㎖를 넣어 같은 방법으로 흔들어 섞은 다음 방치하고 물증은 다시 제3의 반액 깔때기로 옮겨 에텔 50㎖를 넣고 다시 같은 방법으로 흔들어 섞어 추출한다.
5. 제2 및 제3의 분액깔대기 중의 에텔 추출액은 제1의 반액 깔때기로 옮기고 각각 분액깔대기는 소량의 에텔로 씻고 씻은 액이 페놀프탈레인 시액 2방울로 홍색을 나타내지 않을 때까지 씻는다.
6. 에텔액에 무수 황산나트륨 소량을 넣고 1시간 방치한 다음 건조한 여과지를 써서 미리 무게를 단 플라스크에 여과한다.
7. 제1의 분액깔대기는 에텔로 잘 씻고 씻은 액은 먼저의 여과지를 써서 플라스크에 합하고 여액 및 씻은 액을 수욕상에서 가온하여 에텔을 거의 날려 보낸 다음 아세톤 3㎖를 넣고 다시 수욕상에서 가온하여 에텔을 거의 날려 보낸 다음 아세톤 3㎖를 넣고 다시 수욕상에서 증발 건고하고 감압 (약 200㎜Hg) 하에서 70~80℃로 30분간 가열하고 데시케이터 (감압, 실리카 겔)에 옮겨 30분간 식힌 다음 무게를 단다.
8. 플라스크에 에텔 2㎖ 및 중화에탄올 10㎖를 넣고 잘 흔들어 섞어 추출물을 녹인 다음 페놀프탈레인 시액 2~3방울을 넣은 다음 0.1N 수산화칼륨·에탄올액으로 30초간 지속하는 엷은 홍색을 나타낼 때까지 혼입 지방산을 적정한다.

불검화물 (%) = A-(B x 0.0282) / C x 100  A : 추출물의 양 (g)  B : 0.1N 수산화칼륨·에탄올액의 소비량 (㎖)  C : 검체의 양 (g)

 

3. 지식약 및 사용 기구 설명

1) 지시약 : 용액의 액성(pH)에 따라 그 색깔이 달라지는 물질, 대게 약한 산성 또는 약한 염기성 물질로 이루어져 있다. ( 중화 적정 실험 시 2~3방울 정도만 가한다.)

지시약	약호	산성색	변색범위 (pH)	염기성색
메틸오렌지	MO	붉은색	3.1 ~ 4.5	오렌지(주황)색
페놀프탈레인	PP	무색	8.3 ~10.0	붉은(핑크)색
브롬티몰블루	BTB	노랑색	8.0 ~ 9.6	파랑색
리트머스		붉은색	4.5 ~ 8.3	푸른색

2) 냉각기 : 가열된 증기를 냉각하여 액체로 만들고 물질을 증류, 정제하거나 가열시 액체가 기화하여 증발하는 것을 방지하는 기구이다.

• 구조는 중앙의 가는 유리관과 그것을 둘러싼 외통으로 되어 있으며 외통과 중앙의 유리관 사이를 냉각수가 순환함으로써 중앙의 유리관을 통과하는 증류 기체가 냉각 액화되도록 되어 있다.
• 냉각 능률은 그다지 좋지 않지만, 구조가 간단하고 다루기 쉽기 때문에 널리 사용하고 있다.

3) 항온조 : 단열장치가 된 스테인리스 용기에 히터를 설치하여 물을 붓고 온도를 조절 (자동조절)하여 플라스크 등의 액체를 간접 가열시켜 아주 작은 온도의 변화에도 반응을 일으키는 화학, 생리, 생화학 실험에 사용되는 기구이다.